cariotip

Download cariotip

Post on 28-Mar-2015

378 views

Category:

Documents

9 download

Embed Size (px)

TRANSCRIPT

Cariotipul Aberatii cromozomiale

CitogeneticaStudiul cromozomilor si a anomaliilor cromozomiale: - in metafaza - Normal 46 cromozomi: 22 perechi cromozomi somatici +2 cromozomi sexuali XX sau XY anomaliile cromozomiale: prevalenta de 1/150 n.n. vii

bandarea G a cromozomilor

Modelul de benzi este cromozomcromozomspecific

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15 16

17 18 19

20

21

22

X

Y

Aranjarea cromozomilor in cariotip

Indicatii clinice pentru analiza cromozomilorDeficitul cresterii pre-/postnatale pre-/postnatale Avort spontan/n.n. mort Sterilitate/infertilitate Istoric familial de rearanjament cromozomial Valori anormale ale markerilor serici materni/anomalii fetale depistate ecografic Neoplazii

Frecventele unor anomalii cromozomiale in avorturile spontane

Prepararea cariotipului

FISH

Metoda FISH pe nuclei interfaziciSe folosesc probe oligonucleodidice marcate fluorecent pt. diagnosticul aneuplidiilor cromozomilor 13, 18, 21, X, si Y

Nuclei de la acelasi produs de conceptie verde = cromozomul 13 rosu= cromozomul 21 bleu = cromozomul 18 verde = X rosu = Y

Translocatii

Figure 8.23Bx

FISH: Fluorescent IN SITU hybridization

green = probe for end of chromosome 4

red = control probe for centromere of the X chromosome & another probe for end of chromosome X

William's Syndrome

Normal Karyotype

Semnificatia clinica a anomaliilor cromozomialeNonNon-disjunctii in meioza Aberatii cromozomiale numerice Aberatii cromozomiale structurale Screening si diagnosticul prenatal

Anomalii cromozomialeSpermatozoizi 10% Ovocit matur 25% Avort spontan 50% N.n. viu 0.5-1% 0.5In general apar prin non-disjunctii in nonmeioza materna, in corelatie cu varsta gravidei

Nondisjunctii cromozomiale

Aneuploidiile complete ale cromozomilor somatici sunt in general letale. Exceptii: 1. Sindromul Down 2. Sindromul Patau 3. SindromulEdwards

- trisomia 21 - trisomia 13 - trisomia 18

4. Aneuploidiile cromozomilor sexuali

Originea parentala a aneuplidiilor% Trisomia 13 Trisomia 18 Trisomia 21 45,X 47,XXX 47,XXY 47,XYY Paterna % 15 10 5 80 5 45 100 Materna 85 90 95 20 95 55 0

Tipuri de anomalii cromozomiale n avorturile spontane% Trisomia Trisomia 13 2 Trisomia Trisomia 16 15 Trisomia Trisomia 18 3 Trisomia Trisomia 21 5 Alte trisomii risomii 25 Monosomia Monosomia X Incidence

20

Sindromul Down95% liber i omogen 1% mozaicuri mozaicuriEfectul vrstei materne

4% transloca ii

Downs Syndrome Boy

47,XY,+21

Trisomia Trisomia 21 sau Sindromul Down ndromul1. 47, XY, +21 or 47, XX, +21 47, 47, 1866 descris de John Langdon Down. Down. Obstruc ia duodenului, atrezie de esofag, atrezie esof

duoden sau anus. anus. 40% 40% prezint malforma ii cardiace: canal cardiace: atrioventricular , defect de sept ventricular . 95% non95% : non-disjunc ii, restul sunt transloca ii. ii, restul ii. 90 - 95 % n meioza matern 1 - 3 % mozaicuri. mozaicuri. Regiunea Regiunea 21 q22

Sindromul Edward

47,XX,+18

Trisomia 18 ( Edward syndrome) 47, XY, +18 . a II-a trisomie ca frecven Deficitul cre terii prenatale, tr s turi faciale caracteristice. Defecte cardiace congenitale similare cu cele din sdr. Down. Mortalitate crescut :doar 10% supravie uiesc mai mult de 1 an.

Trisomia Trisomia 13

47, 47, XY, +13 Patau syndrome: 1/10000 n.n. vii . syndrome: Malformations severe: severe: cardiace, anencefalie, holoprozencefalie, renale etc Despic tura de buz i palat, microftalmie, polidactilie. microftalmie, polidactilie. Supravie Supravie uire redus 80% 80% trisomie liber , restul transloca ii . restul 95% 95% din sarcinile cu trisomie13 sunt avortate. risomie13 avortate.

Patau Syndrome

Turner Syndrome

Turner syndrome (45, X)-1 /2000 n.n. sex feminin - ntrzierea dezvolt rii sexuale - Fenotip: hipostatur , pterygyum colli, dezvoltare sexual incomplet , ovare transformate ntr-o bandelet fibroas - - 1% din produ ii de comcep ie sunt 45,X - 99% din fe ii 45X sunt avorta i - 75% din cazuri: cromozomul X lips este patern

Aneuploidii gonosomale

Deletion

Anomalii cromozomiale structuraleHomologous chromosomes

Duplication

Inversion

Reciprocal translocation

Nonhomologous chromosomes

Figure 8.23A, B

Translocatia Robertsoniana intre chromosomii 13 si 14

Segregarea cromozomilor la un purtator de translocatie 14/21

Purtatorii de translocatie:- Risc de a produce gameti neechilibrati genetic

- Moartea produsului de conceptie purtator de aberatie cromozomiala- Diagnostic frecvent in familiile in care exista cazuri de malformatii congenitale si avorturi spontane repetate

DeletiiTerminale Cri du chat, 5p15 WolfWolf-Hirschhorn, 4p36 Interstitiale Williams, 7q11.2,microdeletion (FISH)

Retinoblastoma, 13q14 PraderPrader-Willi, 15q11.2 Angelman, 15q11.2 DiGeorge, 22q11.2

Deletii Sdr. Cri du Chat -laringe hipoplazic -microcefalie -dismorfii faciale

Cri du ChatDele ie terminal terminal5p15

Plnset asem n tor mieunatului pisici Retard mental mental

WolfWolf-Hirschhorn Syndrome

Internet Link

Diagnosticul prenatal

Teste de SCREENING { Teste de DIAGNOSTIC

Diagnosticul prenatalTeste de Diagnosticecografie amniocenteza CVS cordocenteza

Teste de screeningecografietranslucencta nucala (NT)

Markerii serici materniTrim II Trim I

Depistarea celulelor fetale in sangele matern (in viitor)

Screeningn trim. I i II Markerilor serici materni serici Ecografic Rezultate anormale: teste invazive de diagnostic

Screening al markerilor biochimiciScreening n I trimestru:Vrsta gravidei free F-hCG Pregnancy associated plasma protein-A protein(PAPP(PAPP-A)

nu n practica curent

Screening prenatal : I trimestruTest de screening : translucen a screening nucal (NT)Se efectueaza intre s pt mnile 10-14 10Depisteaz 54-72% din fe ii cu Sindrom 54Down (DS) Alte anomalii cromozomiale: trisomia 13,18, triploidii, sdr. Turner (45X) 3,5mm NT frecvent la fe ii cu malforma ii 3,5mm cardiace, hernie diafragmatic , malf. renale, defecte de perete abdominal

Screening ecograficTranslucenta nucala (NT) and osul nazal (NB)Se utilizeaza impreuna cu screening seric din trim I pt. sdr. Down. NT (>3.5mm) se asociaza cu un risc crescut pt:: Aberatii cromozomiale Defecte cardiace majore, DTN, alte anomalii structurale Anumote sdr. genetice Intarzierea cresterii intrauterine Cariotip normal dar >NT: Triplu test Morfologie fetala 18-22 weeks 18-

Morfologie fetala

sapt. 18-22 18-

Nu este perfecta: un rezultat normal nu inseamna intotdeauna un copil sanatos

Screening prenatal : II trimestruVarsta gravidei Alpha-fetoproteina Alpha-fetoproteina (AFP) hCG (total, F, free-F, free-E) free- freeestriolul (uE3)* estriolul +/-Inhibina +/-Inhibina

Triplu test: rezultate fals pozitive 5%Down syndrome: 60-70% 60Trisomia 18: 60% DTN: 75-80% 75-

Malformatii congenitaleMajore: 2-3% 2Minore: 14%Sunt implicate in 20% din decesele din prima sapt de viata extrauterina. Etiologie % Necunoscuta 6565-75% Genetica 1515-25% Factori de mediu 10% Afectiuni materne 4% Afenti infectiosi 3% Ag. Chimici, radiatii ~1% Agenti mecanici 11-2%

Malformatii congenitaleAberatii cromozomiale numericeSdr. Down syndrome (trisomia 21)1/ 600-700 n.n.vii 600-

Sdr.Edward (trisomia 18) Sdr.Patau (trisomia 13) Aneuploidii gonosomaleSdr.Turner (45,X) Sdr. Klinefelter (47,XXY) 47,XXX; 47,XYY

Malformatii congenitaleAfectiuni monogenice-example: monogeniceTransmitere A.D, A.R, X-linkat XSdr. Marfan FragileFragile-X Acondroplaziaetc etc

Anomalii congenitaleAfectiuni materne:Diabet fenilcetonuria alcoolism

Agenti infectiosi: rubeola, toxoplasma, v.herpetic etc

Metode de diagnosic prenatalBiopsia de vilozit i corialeSe efectueaza intre s pt mnile 10-12 10Abord transabdominal sau transcervical Tesutul placentar este utilizat:cariotip Depistarea afec iunilor monogenice (defect genic cunoscut) cunoscut)

Risc de avort: 1% Risc avort:

Prenatal diagnosis: chorionic villi sampling (CVS)

sampling cells from placenta usually done 10-12 weeks

Teste invazive de diagnostic: biopsia de vilozitati coriale

Test CVS

Risc de avort Moment optim1/100

Rezultat11-12sapt

11 sapt.

Rezultate neconcludente (CVS)1% CVS se obtin rezultate ambigui Contaminare cu celulele materne Mozaicism placentar (CPM) Mozicism adevarat al fatului Repetarea testului prin amniocenteza sau cordocenteza

Metode de diagnosic prenatalAmniocentezaSe efectueaza intre s pt mnile 15-20 1510-20 ml L.A 10Cariotip ariotip Dozarea Alpha-fetoproteinei (AFP) Alpha-fetoproteinei Alte teste biochimice: bilirubina, acetilcolonesteraza QFQF-PCR sau FISH pt. diagnosticul citogenetic rapid

Risc de avort: ~0,5% avort: 0,5%

Amniocenteza: sapt 15-18

Teste invazive de diagnostic: amniocenteza

Test

Risc de avort

Moment optim Rezultat16 sapt. 18-22sapt.

Amniocenteza

1/200

Quantitative Fluorescent PCR

Diagnosticul prenatal rapid al trisomiilorUtilizeaza polimorfisme ADN pt. a defini nr. de copii

Marker polimorfic ADN de pe cz. 21Ratio: 1 1 : 1 :

Ratio:

1 :

2

CVS vs amniocentezaCVSS pt.10-12 pt.10Risc de avort: 1 /100 avort: Nu diagnosticul NTD Analize ADN rezultat: 2s pt; FISH: rezultat: 2s pt; 72h mozaicism:1-2% mozaicism:1+/- D&C +/-

Amniocenteza AmniocentezaS pt.15-2