assei mirobiologi.pdf

8/10/2019 assei mirobiologi.pdf

1/7

0

LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI DAN VIROLOGI

ASSEI MIKROBIOLOGI

Nama : I Gusti Ayu Nyoman Suastini

NIM : 1208505061

Kelompok : V

Golongan : II

Tanggal Praktikum : 22 April 2014

Asisten : Desi Bintari

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS UDAYANA

2014


2/7

1

I. PENDAHULUAN

1.1Latar Belakang

Pengontrolan pertumbuhan mikroorganisme dapat dilakukan dengan

menggunakan zat-zat kimia, perlakuan fisik ataupun perlakuan biologis. Senyawa

kimia yang terdapat dalam tanaman dapat digunakan sebagai antimikroba atau

menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Assei mikrobiologi dilakukan untuk

mengetahui aktivitas atau potensi antibiotik yang ditunjukan pada kondisi yang

sesuai dengan efek daya hambat terhadap mikroorganisme. Suatu penurunan

aktivitas antimikroba juga dapat menunjukkan perubahan kecil yang tidak dapat

ditunjukkan oleh metode kimia sehingga pengujian secara mikrobiologi atau

biologi biasanya merupakan standar untuk mengatasi keraguan tentang

kemungkinan hilangnya aktivitas (Harmita dan Radji, 2008).

Zat antimikroba yang digunakan dalam pengobatan bertujuan untuk

mengeleminasi mikroorganisme infektif atau mencegah terjadina infeksi. Zat

antimikroba yang berguna untuk terapi harus menghambat mikroorganisme

infektif dan bersifat toksik hanya terhadap patogen infektif, tetapi tidak terhadap

inangnya. Antibiotik mewakili kelompok terbesar dari zat antimikroba. Antibiotik

adalah zat biokimia yang diproduksi oleh mikroorganisme yang dalam jumlah

kecil dapat menghambat pertumbuhan atau membunuh mikroorganisme lain

(Harmita dan Radji, 2008).

Kandungan senyawa kimia dalam tumbuhan juga dapat digunakan sebagai

zat antimikroba. Maka dari itu dilakukan suatu pengujian terhadap beberapa

tumbuhan yang diduga memiliki aktivitas antimikroba.

1.2

Tujuan

1.Untuk mengetahui teknik yang digunakan dalam menentukan potensi suatu

senyawa sebagai antimikroba

2.Untuk mengetahui daya hambat sampel sebagai antimikroba


3/7

2

II. MATERI DAN METODE

Pada praktikum ini dilakukan percobaan assei mikrobiologi untuk mengetahui

potensi suatu senyawa sebagai antimikroba. Metode yang digunakan adalah metode

sumur difusi. Sampel yang digunakan pada percobaan ini yaitu, kencur, lengkuas,

bawang putih, daun sirih, jeruk nipis dan rimpang jahe. 200l kulturE. coliditambahkan

dengan 10 mL nutrient agar (NA). Media yang telah membeku selanjutnya dibuatkan

sumur difusi sebanyak 4 buah yang masing-masing ditandai sebagai: K1 (kontrol

antibiotik levofloxacin), K2(kontrol air steril), U1(ulangan ekstrak sampel), U2(ulangan

ekstrak sampel). Ekstrak sampel dibuat dengan cara menggerus masing-masing sampel

tersebut pada mortir dan ditambahkan sedikit air steril kemudian diperas dengan kain

kasa hingga diperoleh ekstrak dari sampel tersebut. Pada sumur difusi masing-masing

ditambahkan 20l antibiotik pada K1, air steril pada K2dan ekstrak sampel pada U1dan

U2. Selanjutnya dilakukan inkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam dan diamati zona

bening sebanyak 4 kali ulangan kemudian dihitung rata-ratanya dan % daya hambat.

III. HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1Hasil Pengamatan

(Terlampir)

3.2Pembahasan

Aktivitas atau potensi antibiotik dapat ditunjukkan pada kondisi yang

sesuai dengan efek daya hambat terhadap mikroorganisme (Harmita dan Radji,

2008). Pada keenam sampel yang digunakan, 4 dari sampel (lengkuas, bawang

putih, daun sirih, dan jeruk nipis) menunjukkan adanya aktivitas antimikroba

yang ditandai dengan adanya zona bening yang mengelilingi sumur difusi tempat

zat dengan aktivitas antimikroba terdifusi.

Berdasarkan hasil percobaan, rimpang jahe dan kencur tidak menunjukkan

adanya aktivitas daya hambat. Hal ini tidak sesuai dengan literatur yang

menyebutkan bahwa kencur dan jahe mempunyai aktivitas antimikroba terutama

S. aureus danE. coli.Kencur memiliki minyak atsiri yang tersusun atas etil ester

asam sinamat, etil ester asam para metoksi sinamat, borneol, campfen, dan


4/7

3

golongan senyawa flavonoid (Mursito, 2003). Selain itu, menurut Hapsari (1994)

yang dalam penelitiannya menyebutkan bahwa kencur mempunyai daya

antibakteri terhadapE. coli. Ketidaksesuaian percobaan dengan pustaka yang ada

dapat disebabkan oleh senyawa yang bersifat sebagai antimikroba yang terdapat

dalam kencur dan jahe tidak sepenuhnya terdistribusi dalam pelarut air steril,

sehingga diperlukan ekstraksi khusus untuk memperoleh ekstrak yang diinginkan.

Jahe mengandung senyawa antimikroba golongan fenol, flavonoid,

terpenoid dan minyak atsiri yang terdapat pada ekstrak jahe merupakan golongan

senyawa bioaktif yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba (Nursal, dkk.,

2006). Adanya senyawa fenol mengakibatkan terjadinya penghambatan pada

sintesis dinding sel. Penghambatan pertumbuhan sel mikroba oleh komponen

fenol atau alkohol dari rempah-rempah disebabkan kemampuan fenol untuk

mendenaturasi protein dan merusak membran sel dengan cara melarutkan lemak

yang terdapat pada dinding sel, karena senyawa ini mampu melakukan migrasi

dari fase cair ke fase lemak (Purwani, dkk., 2009). Lengkuas menurut Sinaga,

dkk., (2009) yang dalam penelitiannya menyebutkan bahwa lengkuas juga

memiliki aktivitas antibakteri akibat adanya kandungan minyak atsiri di

dalamnya.

Allium sativum (bawang putih) memiliki zat aktif allicin yang efektif

untuk membunuh mikroba. Allicin merupakan senyawa sulfur yang reaktif dan

cenderung tidak stabil yang mempunyai kemampuan untuk melawan katalisator

biologis (enzim) khususnya yang berda di dalam atau di bawah lapisan bakteri

yang dibutuhkan untuk pertumbuhan reproduksi bakteri (Ramadanti, 2008). Daun

sirih mengandung senyawa fenol yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.

Fenol dapat berperan sebagai racun bagi mikroba yaitu dengan menghambat

aktivitas enzim, berikatan dengan gugus sulfhidril dan protein (Suliantari, dkk.,

2008). Pada percobaan ini jeruk nipis memiliki aktivitas antimikroba yang tinggi

yaitu 90,22%. Aktivitas antibakteri dari buah jeruk nipis karena mengandung

sejumlah asam organik seperti asam sitrat yang merupakan komponen utama,


5/7

4

asam malat, asam laktat dan asam tartarat. Penghambatan sebagai antibakter dari

asam organuk karena penurunan pH di bawah kisaran pertumbuhan

mikroorganisme dan penghambatan metabolisme oleh molekul asam yang tidak

terdisosiasi (Rahardjo, 2012).

IV. KESIMPULAN

4.1Teknik yang digunakan dalam menentukan potensi suatu senyawa sebagai

antibiotik adalah metode sumur difusi. Metode ini berdasarkan difusi senyawa

dari sumur yang dibuat tegak lurus pada lapisan agar padat dalam cawan petri.

Mikroorganisme yang ditambahkan senyawa antibiotic akan dihambat

pertumbuhannya yang membentuk zona bening di sekeliling sumur yang berisi

senyawa antibiotik.

4.2Berdasarkan percobaan, empat sampel yaitu, lengkuas, bawang putih, daun sirih

dan jeruk nipis memiliki aktivitas daya hambat terhadap mikroorganisme, dimana

aktivitas daya hambat terbesar terdapat pada jeruk nipis sebesar 90,22%. Sampel

kencur dan jahe tidak menunjukkan aktivitas daya hambat, ha ini tidak sesuai

dengan literatur yang menyebutkan bahwa kencur dan jahe dapat menghambat

pertumbuhan mikroorganisme.

DAFTAR PUSTAKA

Hapsari, R. 1994. Daya Antibakteri Kencur (Kaempferia galangal, Linn) TerhadapStaphyloccocus aureus dan Escherichia coli Koleksi Laboratorium

Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada Secara In Vitro.

Pusat Penelitian dan Pengembangan Farmasi Badan Penelitian dan

Pengembangan Kesehatan Departemen Kesehatan Republik Indonesia. JakartaHarmita dan M. Radji. 2008. Buku Ajar Analisis Hayati. Cetakan I. Penerbit Buku

Kedokteran EGC. Jakarta

Mursito, B. 2003. Ramuan Tradisional Untuk Pelangsing Tubuh. Penebar Swadaya.

JakartaNursal, S. Wulandari., W. S. Juwita. 2006. Bioaktifitas Ekstrak Jahe (Zingiber

officinale Roxb) dalam Mengahambat Pertumbuhan Koloni Bakteri

Escherichia colidan Bacillus subtilis. Jurnal Biogenesis 2 (2) : 64-66. ISSN:1829-5460


6/7

5

Purwani, E. S. W. N. Hapsari., R. Rauf. 2009. Respon Hambatan Bakteri Gram

Positif dan Negatif Pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus) yang Diawetkan

Dengan Ekstrak Jahe (Zingiber officinale). Jurnal Kesehatan 2 (1) : 61-70:ISSN 1979-7621Rahardjo, A. H. D. 2012. Efektivitas Jeruk Nipis Dalam Menurunan Bakteri

Salmonella danE. coliPada Dada Karkas Ayam Broiler.IJAS2 (3) : 91-94

Ramadanti, I. A. 2008. Uji Aktivitas Bawang Putih (Allium sativum) TerhadapBakteri E. coli In Vitro. (Skripsi). Fakultas Kedokteran Universitas

Diponegoro

Sinaga, E., Noverita., dan D. Fitria. 2009. Daya Antibakteri Jamur Endofit Yang

Diisolasi dari Daun Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga). Jurnal FarmasiIndonesia 4 (4) : 161-170

Suliantari., B. S. L. Jenie., M. T. Suhartono., dan A. Apriyantono. 2008. Aktivitas

Antibakteri Ekstrak Sirih Hijau (Piper betle L) Terhadap Bakteri PatogenPangan.Jurnal Teknologi dan Industri Pangan 19 (1) : 1-7


7/7

6

LAMPIRAN

Gambar 1. Hasil Inkubasi Sampel Jeruk Nipis

assei mirobiologi.pdf

Documents