4. prosedur pengambilan air kencing, analisis dan perekodan

7/28/2019 4. Prosedur Pengambilan Air Kencing, Analisis Dan Perekodan

1/60

MUHAMMAD NUBLI BIN MOHD SHUH AIMIPEGAWAI SAINS (KIMIAHAYAT)MAKMAL DADAH & P ENYEL IDIKANJABATAN PATO LOGIHOSPITAL K UALA LUMPURKE ME NTE RIAN KE SIH ATAN MA LAYSI A

21 JUN 2013

PROSEDUR PENGAMBILAN

AIR KENCING, ANALISISDAN PEREKODAN


2/60

PENGENALAN

Makmal Dadah & Penyelidikan HKL ditubuhkan1992

Makmal Rujukan bagi makmal makmal KKM

> 120 buah makmal Menawarkan Ujian Dadah Berbahaya

a) ATS Seluruh Semenanjung Msia(kecuali P.Pinang)

b) DOA (Morphine & THC)- Lembah Klang Sahaja

c) Ketamin Seluruh semenanjung Msia


3/60

Pengenalan

Beban kerja : Anggaran > 100,000 setahun

Waktu perkhidmatan

a) Isnin- Jumaat : 8am-5pm

(kecuali sabtu & ahad serta hari pelepasan umum) Turut menawarkan ujian penanda kanser danprotein khas & ujian Therapeutic Drug Monitoring(TDM) bagi kes kes pemindahan transplant organ


4/60

Peranan Makmal Dadah & PenyelidikanHospital Kuala Lumpur

Makmal Rujukan bagi makmal makmal dibawahKKM

Makmal patologi bagi ujian yang di rujuk oleh pihak

PDRM , ATM,AADK dan lain lain agensi Memberi khidmat nasihat teknikal kepada agensi

seperti khidmat evaluasi test strip bagi kemasukantender

Memberi latihan kepada pegawai-pegawaiKKM,agensi agensi jabatan kerajaan dan jugapelajar-pelajar universiti


5/60

DADAH & PENYALAHGUNAAN

Dadah adalah bahan yang apabila di serap kedalam badanakan mengubah fungsi normal badan.

Dadah berbahaya di Malaysia adalah dadah yangdisenaraikan dalam Akta Dadah 1952.

Penyalahgunaan dadah - pengambilan bahan dadahpsikoaktif atau dadah perangsang bukan untuk tujuanperubatan. Contoh bahan yang disalahgunakan: alkohol,kumpulan dadah amphetamin, barbiturat, benzodiazepine,kanabis, ketamin and opiate. Penyalahgunaan bahan-bahanini boleh memberi kesan buruk kepada fizikal dan psikologi.


6/60

PENGAMBILAN DADAH & PENYERAPAN DALAMBADAN

RE 04/112011

Jantung

Buah pinggang

Paru-paru

Hati

Perut

UsusSuntikan

Melalui mulut

Sedutan


7/60


8/60

METABOLISMA Dadah yang diambil akan melalui proses metabolisma dalam

badan

Metabolisma menukarkan bentuk asal dadah yang diambilkepada bentuk yang lain dan menghasilkan metabolit

Kadar metabolisma berbeza dari satu individu ke individu yanglain

Kadar metabolisma juga berbeza mengikut dadah yang diambildan cara pengambilan dadah tersebut

Oleh itu masa persampelan adalah penting bagi mengesanpenyalahgunaan dadah


9/60

METABOLISMA OPIATE


10/60


11/60

METABOLISMA AMPHETAMINE


12/60

METABOLISMA MDMA


13/60

METABOLISMAMETHAMPHETAMINE


14/60

METABOLISMA METHAMPHETAMINE

50% Methamphetamine akan dikeluarkan daribadan dalam masa 12 jam.

44% methamphetamine keluar dalam air kencingdalam bentuk asal, 6-20% sebagai amphetamine

dan 10% sebagai 4-hydroxymethamphetamine.

Boleh didapati dalam air kencing dalam masa 20min selepas pengambilan

Masa pengesanan: sehingga 48 jam (dalam bentukasal)


15/60

METABOLISMA KETAMINE Ketamine di metabolisma dalam sistem mikrosom hati (hepatic microsomal

system). Pathway utama:

N-demethylation

ketamine norketamine(metabolit utama)

Norketamine memberi kesan 20-30% kepada aktiviti ketamine; akan di tukar kepadadehydoxynorketamine, bergabung dengan glucuronate and dikeluarkan dalam airkencing. Norketamine, t1/2(elimination) = 6 jam, memberi kesan analgesia.


16/60

FAKTOR YANG MEMBERI KESAN KEPADATEMPOH DADAH DALAM BADAN

Tempoh dadah dapat dikesan dalam air kencing

bergantung kepada faktor-faktor berikut:

Amaun and kekerapan pengambilan:Jika satu dos diambil, dadah dikesan pada kepekatan yang rendahyang hampir dengan nilai cut-off. Pengambilan yang berulang /lama akan menghasilkan keputusan positif pada nilai yang lebihtinggi

Kadar metabolisma:Dadah dapat dikesan lebih lama dalam individu yang mempunyaikasar metabolisma yang rendah

Berat badan:Secara amnya, metabolisma seseorang individu akan lebih rendah

apabila berat badan bertambah. Ini akan mengakibatkan dadah lebihlama dapat dikesan terutama bagi dadah PCP dan THC dimanadadah-dadah ini disimpan dalam tisu lemak.


17/60

FAKTOR YANG MEMBERI KESAN KEPADATEMPOH DADAH DALAM BADAN

Umur:Secara amnya, metabolisma akan lebih rendah denganpeningkatan umur dan ini juga akan mengakibatkan dadah bolehdikesan lebih lama

Kesihatan badan:

Secara amnya metabolisma seseorang individu akan

menurun apabila kesihatan terganggu dan inimenyebabkan dadah dikesan dalam badan lebih lama

Toleransi kepada dadah:

Metabolisma dadah lebih cepat apabila seseorang individutoleran terhadap sesuatu dadah

pH air kencing:

pH air kencing memberi impak pada masa pengesanan.Biasanya air kencing yang asidik akan menyebabkan masapengesanan yang lebih singkat


18/60

FAKTOR YANG MEMBERI KESAN PADAKEPUTUSAN UJIAN

Perjalanan darahpengaliran air kencing,pH

Perbezaan genetik,

metabolisma

Kadar /

Kekerapan

pengambilan

Result

Aktiviti Fizikal

Pemakanan, diet

Masa

Persampelan

Pencemaran air

kencing

Kaedah

analisaInteraksi

dengan

dadah lain

Tolerens

Carapengambilan

Dos

Fungsi Organ


19/60

SPESIMEN UJIAN DADAH

Spesimen untuk ujian dadah :-Air kencing Darah RambutAir liur.

Air kencing adalah spesimen paling sesuai kerana kepekatandadah adalah tinggi

Darah, rambut dan air liur jarang digunakan kerana kepekatandadah dalam spesimen-spesimen ini rendah dan kos analisisadalah lebih tinggi

Walaubagaimanapun kebaikan penggunaan darah dan air liursebagai spesimen adalah dadah dapat di kesan dalam masabeberapa minit selepas pengambilan manakala dadah dalamrambut dapat dikesan bertahun selepas pengambilan.


20/60

JANGKAMASA DADAH DAPATDIKESAN SELEPAS PENGAMBILAN

Dadah Air kencing Darah

Amphetamine 1 - 3 hari 12 jam

Methamphetamine 3 - 5 hari 1 3 hari

MDMA 4 hari 25 jam

THC 20 28 hari -

Heroin 3 4 hari 6 jam

Codeine 1 hari 12 jam

Morphine 2 hari 6 jam

Ketamine 2 - 4 hari 6 jam


21/60

PROSEDUR PEMUNGUTAN SPESIMENAIR KENCING

Kawasan pemungutan spesimen:

Kawasan khas yang diasingkan dan terkawal

Akses pada individu tertentu sahaja

Tidak mempunyai bekalan air semasa pemungutanspesimen dilakukan

Tiada bekalan sabun dan lain-lain bahan yang bolehdigunakan untuk mencemar spesimen


22/60


Prosedur pemungutan spesimen

Pastikan identiti OKT

Isi maklumat OKT dalam borang permohonan UPD -1 dalam 2 salinan.Pastikan borang lengkap, ditandatangani dan dicop dengan cop jabatan

Minta OKT pilih bekas / botol spesimen dan labelkan (Nama OKT, NoPengenalan, Tarikh. Masa)

Iringi OKT dan pungut spesimen

Sekurang-kurangnya 30 ml air kencing diperlukan


23/60


Sekiranya air kencing tidak mencukupi, minta OKT minum airkosong (240 ml setiap 30 minit tetapi tidak melebihi 720 ml).

Air kencing yang dipungut kali kedua dicampurkan dengan air

kencing pertama

Minta OKT tandatangan pada Akuan Pemberi

Lakukan ujian air kencing dihadapan OKT. Pastikan pegawaiyang menjalankan ujian telah terlatih

Metri bekas spesimen sekiranya ujian saringan didapati positif


24/60


Masukkan spesimen dalam bekas yang sesuai (sebaik-baiknyadengan mengunakan beg berkunci yang diisi dengan pek ais)

Hantar spesimen ke makmal secepat mungkin

Sekiranya spesimen tidak boleh dihantar pada hari yang sama,simpan spesimen dalam peti sejuk. Bekukan spesimen jikaspesimen perlu disimpan lebih dari 3 hari

Pastikan chain of custody dilaksanankan bagi setiap spesimen

dengan merekodkan tarikh, masa dan pegawai yang terlibatdalam proses pengendalian spesimen


25/60

KESTABILAN DADAH DALAMSPESIMEN BIOLOGIKAL

RE 04112011

Kestabilan dadah dalam spesimen biologikalbergantung kepada:

jenis spesimen keadaan penyimpanan

suhu

pendedahan kepada cahaya

Jangkamasa spesimen di simpan


26/60

PROSEDUR PENGHANTARAN &PENERIMAAN SPESIMEN

Pegawai penghantar mestilah pegawai yang telahdikenalpasti

Pastikan spesimen selamat semasapenghantaran

Pastikan nama pegawai penghantar direkodkandalam rekod chain of custody

Pastikan maklumat penerima direkod semasapenyerahan


27/60

PENOLAKAN SPESIMEN

Spesimen yang tidak sesuai akan ditolak oleh makmal

Kriteria penolakan:

Kesilapan pada nama, no. pengenalan atau lain-lainmaklumat pada label dan /atau borang;

Bekas tidak di metri atau metri rosak/pecah;

Terdapat lebih dari satu label pada bekas;

Bekas tidak berlabel;


28/60


29/60

PROSEDUR ANALISIS UJIAN DADAH

Negatif

Laporan

Ujian pengesahanLaporan

Positif

Keputusan ujian

saringan

Pemungutan Conthh

Ujian saringan

Penerimaan contoh

Penghapusan contoh


30/60

UJIAN PENGESANAN DADAH

Ujian dadah dilakukan dalam 2 peringkat

i) Ujian Saringan

direkabentuk sebagai ujian yang sensitif untuk mengesanpenggunaan dadah. Ujian saringan kurang spesifik dan

tidak dapat membezakan dadah-dadah dalam kumpulansama Ujian biasanya lebih mudah dilakukan dari ujian

pengesahan

ii) Ujian Pengesahan

Direkabentuk untuk lebih spesifik iaitu dapat membezakandadah tertentu dan metabolitnya

Ujian dilakukan apabila ujian saringan adalah positif


31/60

NILAI CUTOFF

Digunakan untuk membezakan contoh positif atau negatif Berbeza mengikut dadah yang dikesan dan kaedah yang digunakan

Contoh cutoffyang digunakan oleh KKM

Saringan Pengesahan

Opiates : 300 ng/ml Morphine : 200 ng/ml

THC : 50 ng/ml Cannabis : 25 ng/ml

ATS : 1000 ng/ml ATS : 500 ng/ml

Ketamine : 1000 ng/ml Ketamine : 350 ng/ml


32/60

UJIAN SARINGAN

Ujian saringan diguna untuk mengasingkanspesimen "negative.

Spesimen negative adalah specimen yang tidakmengandungi dadah atau kepekatan dadah adalahlebih rendah dari kepekatan cutoff

Spesimen yang didapati positif dengan ujian

saringan hendaklah diuji semula dengan ujianpengesahan


33/60

UJIAN SARINGAN

Ujian Pantas (Rapid test)- KaedahDry Chemistry

- Dalam bentuk Urine strip/cassette

- Sesuai di gunakan sebagaifield test kit (Point of care)

- Ujian kualitatif

- Prisip ujian berdasarkan tindakbalas antibody dan antigen.


34/60

UJIAN RAPID TEST / TEST STRIP

Rapid test adalah ujian berprinsipkan lateral flowimmunoassay.

Reagen immunoassay terdapat pada beberapabahagian test strip.

Apabila test strip dicelup kedalam air kencing,spesimen akan bergerak naik dan akan bertindakdengan reagen yang terdapat pada test strip

Garisan bewarna merah pada bahagian ujian akanmemberi keputuan negatif dan yang tidakmembentuk warna akan dilaoporkan sebagai positif.


35/60

PROSEDUR UJIAN SARINGAN -Ujian Pantas (Rapid test)

Celup test strip dalam air kencing hingga keparasujian dan tunggu hingga iar kencing naik 1/3 teststrip

Letak test strip pada permukaan mendatar danbiarkan selama 5 min (ikut prosedur ujian sepertidalam lampiran/arahan yang disertakan olehpembekal)

Baca keputusan mengikut warna yang terbentukpada garisan


36/60

PROSEDUR MENJALANKAN UJIAN


37/60

BEKAS SPESIMEN YANG DIGUNAKAN


38/60

BEKAS SPESIMEN YANGDIGUNAKAN

Bekas yang paling sesuai adalah bekas yang tidak mudah pecahdan mempunyai ciri-ciri keselamatan seperti nombor siri / tape

keselamatan


39/60

BACAAN KEPUTUSAN


40/60

KEPUTUSAN RAPID TEST

NEGATIF NEGATIF POSITIF


41/60

KEBAIKAAN & KELEMAHAN UJIANRAPID TEST

Kebaikan Tidak memerlukan peralatan khas

Pantas dan mudah dilaksanakan

Boleh digunakan sebagai field test

Kelemahan

Tidak dapat membezakan dadah-dadah dalam kumpulanyang sama

Mempunyai cross-reactivity dengan dadah-dadah lain

Biasanya > 90% adalah tepat Hanya boleh digunakan sebagai ujian saringan.


42/60

UJIAN SARINGAN DI MAKMALUjian Immunoassay Wet Chemistry (Ujian di

makmal)

Menggunakan prinsip tindakbals antibody and antigenuntuk memberi nilai kuantitatif

Proses melibatkan penggunaan antibody untuk mengesandadah dalam contoh

Kepekatan dadah dalam contoh dibandingkan dengankalibrator yang mempunyai kepekatan dadah yangdiketahui.

Contoh yang mempunyai kepekatan lebih tinggi darikalibrator akan memberi keputusan positif


43/60

ANALISIS DALAM MAKMAL


44/60

Specificity & Cross-reactivity

Bahan yang boleh memberi kesan positif dengan ujianMethamphetamine dengan nilai cutoff 1000 ng/ml

Kompaun Kepekatan

Amphetamine 1286 ng/ml

MDMA 20538 ng/ml

MDA 3537 ng/mlEphedrine 2242 ug/ml

Phentermine 21 ug/ml


45/60

UJIAN SARINGANSensitivity & Specificity

Amphetamine/Methamphetamine Assay memberiKeputusan positif dengan bahan-bahan berikut:

d-Amphetamine


46/60

UJIAN SARINGANBahan-bahan yang boleh menggangu

keputusan

Ibuprofen; (Advil, Nuprin,Motrin, Excedrin IB etc)

Naproxen (Aleve)

Ketoprofen (Orudis KT) Promethazine

(Phenergan,Promethegan)

Riboflavin (B2, HempseedOil)

Kidney infection (Kidneydisease, diabetes) Liver

Disease Dronabinol (Marinol)

Bahan atau

keadaan yangboleh

menyebabkan

false positives

dengan ujian

Marijuana

CONTOH


47/60

INTEPRETASI KEPUTUSAN UJIAN

SARINGAN Keputusan negatif spesimen tidak mengandungi

dadah yang diuji atau kepekatan dadah adalah lebihrendah dari nilai cut-off

Keputuan positif

spesimen mungkin mengandungidadah yang diuji

Hanya keputusan negatif boleh dilapurkanmelalui ujian saringan.

Contoh yang didapati positif melalui ujian saringantidak boleh dilapurkan dan perlu diuji semula denganujian pengesahan


48/60

UJIAN PENGESAHAN

Semua contoh positif dalam ujian saringan mestidiuji semula dengan menggunakan ujianpengesahan

Ujian pengesahan hendaklah mempunyai prinsip yangberbeza daripada ujian saringan

Ujian pengesahan yang biasa digunakan adalahberdasarkan prinsip kromatografi

Ujian pengesahan dapat membezakan satu jenis dadahdari yang lain

Contoh Ujian Chromatography - Thin layerchromatography (TLC), gas liquid chromatography (GLC),high performance liquid chromatography(HPLC), gaschromatography/mass spectrometry (GC/MS) dan liquidchromatography mass spectrometry (LCMS).


49/60

GAS CHROMATOGRAPHY MASSSPECTOMETRY (GCMS)


50/60

ANALYSIS ATS DENGAN GCMS


51/60

RE 04112011

GAS CHROMATOGRAPHY MASSSPECTROMETRY - CONTOH KEPUTUSAN

Kaedah yang sensitif dan spesifik


52/60

KEPUTUSAN GCMS


53/60

INTEPRETASI KEPUTUSANUjian Pengesahan

Keputusan positif bermaksud dadah terkandungdalam urin pada kepekatan atau lebih dari paras

cutoff.

Keputusan positif tidak dapat menentukan dos

dadah yang diambil atau masa atau carapengambilan dadah tersebut


54/60

Keputusan Negatif menunjukkan dadah tidak terdapatdalam contoh atau berada pada paras yang lebih rendahdari nilai cutoff pada masa ia diuji

Ia tidak dapat menentukan individu pernah atau tidakpernah mengambil dadah

INTEPRETASI KEPUTUSAN

Ujian Pengesahan


55/60

LAPORAN KEPUTUSAN

True Negative (Betul Negatif) Keputusanyang dilaporkan sebagai NEGATIF apabilaseseorang individu tidak mengambil dadah

yang diuji.

True Positive (Betul Positif) Keputusanyang dilaporkan sebagai POSITIF apabila

seseorang individu mengambil dadah yangdiuji


56/60

LAPORAN KEPUTUSAN

False Negative (Salah Negatif) keputusanyang dilaporkan sebagai NEGATIF apabilaseseorang individu mengambil dadah yang diuji

False Positive (Salah Positif) keputusanyang dilaporkan sebagai POSITIVE apabilaseseorang individu tidak mengambil dadah yang

diuji.


57/60

INTEPRETASI KEPUTUSAN

Contoh masalah dalam intepretasi keputusan

Morfin boleh datang dari pegambilan kas-kas atauubat batuk yang mengandungi kodein.

Kepekatan ephedrine yang tinggi boleh menyebabkanspesimen positif untuk Methamphetamine.


58/60

PROSEDUR PENYERAHAN LAPORAN

Laporan diserah kepada pembawa sampel

Laporan tidak akan diserah kepada donor air

kencing

Laporan dimasukkan kedalam sampul suratdan dimetri

Pegawai yang mengambil laporanmenandatangani pada borang Chain ofCustody makmal


59/60

PROSEDUR PENGAMBILAN SEMULASAMPEL

Permohonan untuk pengambilan semulasampel dilakukan secara bertulis

Sampel akan di metri dan diletakkan dalambeg keselamatan

Penerima sampel menandatangani suratpenyerahan sampel


60/60

4. prosedur pengambilan air kencing, analisis dan perekodan

Documents